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小鼠避暗儀的實(shí)驗(yàn)方法及注意事項(xiàng)

時(shí)間:2025-05-14 點(diǎn)擊:276次

小鼠避暗儀的實(shí)驗(yàn)方法  
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備  
熟悉環(huán)境:實(shí)驗(yàn)前2天使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,自由飲食、攝水。  
分組設(shè)計(jì):按分層隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),使各組動物平均體重和性別比例相似。實(shí)驗(yàn)小鼠按訓(xùn)練方法不同分為單次適應(yīng)單次電擊(MOS)、單次適應(yīng)限時(shí)訓(xùn)練(MOL)、多次適應(yīng)限時(shí)訓(xùn)練(MUL)3組,每組根據(jù)給藥不同分為對照(C)和模型(M)兩個(gè)亞組,最后共6組(每組n=9)。  
儀器設(shè)置:避暗儀分為明、暗兩室,其間有一直徑為3cm的圓洞,兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部銅柵可通電,電壓通過按鈕調(diào)節(jié),一般為40V,50Hz。  
訓(xùn)練方法  
MOS法:訓(xùn)練在一天內(nèi)完成,先將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)環(huán)境3min,訓(xùn)練時(shí)將小鼠背對洞口放入明室內(nèi),其進(jìn)入暗室受到電擊即取出。  
MOL法:訓(xùn)練在一天內(nèi)完成,小鼠適應(yīng)環(huán)境3min,訓(xùn)練3min。  
MUL法:連續(xù)3天在同一時(shí)間將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)3min,第三天適應(yīng)完成后開始訓(xùn)練,3min后取出。適應(yīng)環(huán)境和訓(xùn)練時(shí)任小鼠在明室和暗室之間自由穿梭,步入潛伏期大于3min者棄去不用。  
測試方法  
記錄指標(biāo):訓(xùn)練完成24h后將小鼠再次放入明室,記錄其第一次進(jìn)入暗室所需的時(shí)間,即步入潛伏期(STL)和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù),即錯(cuò)誤次數(shù)(ETs)。若5min內(nèi)小鼠未進(jìn)入暗室則STL記為300s,ETs記為0。  
注意事項(xiàng)  
實(shí)驗(yàn)環(huán)境  
環(huán)境清理:實(shí)驗(yàn)前后注意清理點(diǎn)擊柵欄動物排泄物,排泄物會影響通電性。通過酒精擦拭、晾干盡可能去除上一只動物氣味,儀器設(shè)備需具備通風(fēng)系統(tǒng)。  
減少干擾:在實(shí)驗(yàn)過程中必須保持所有實(shí)驗(yàn)程序一致,如屏蔽噪音、減少氣味刺激、調(diào)節(jié)光線等,實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)該安靜、昏暗,盡量輕巧抓取動物,減少對動物的刺激。關(guān)閉兩箱中間的門時(shí)要輕柔,不要制造過多外界的聲響影響動物行為。  
實(shí)驗(yàn)操作  
動物適應(yīng):實(shí)驗(yàn)開始前3-7天,每天抓取、輕撫動物,讓其適應(yīng)被實(shí)驗(yàn)人員抓取,避免實(shí)驗(yàn)過程中因?qū)嶒?yàn)人員抓取而造成動物處于應(yīng)激狀態(tài),造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠的問題。  
電擊參數(shù):大鼠電流為0.65-1.8mA(推薦0.8mA),或電壓65-70V;小鼠電流為0.15-0.6mA(推薦0.25mA),或電壓30-36V,頻率為5-15Hz電流。  
設(shè)備維護(hù):實(shí)驗(yàn)儀器底部的銅柵容易生銹,導(dǎo)致電阻增加,每次實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)以砂紙打磨光滑。

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